أطروحة دكتوراه في طب بابل تناقش علاقة الخمول المناعي بقابلية الإصابة بعصيات التدرن
جرت صباح يوم الاربعاء الموافق 20/7/2022 على قاعة الدراسات العليا في كلية الطب جامعة بابل مناقشة علنية في علم الاحياء المجهرية لطالبة الدكتوراه اسراء خضير عبيس الفتلاوي عن اطروحتها الموسومة (دراسة علاقة الخمول المناعي بقابلية الإصابة بعصيات التدرن) حضرها المعاون الاداري الاستاذ الدكتور كاظم جواد الحمداني وعدد من التدريسين وطلبة الدراسات العليا.
حيث تألفت لجنة المناقشة من الاستاذ الدكتور عبد النبي جويد عبد رئيسا وعضوية كل من الاستاذ الدكتورة هيام خالص المسعودي والاستاذ الدكتور حيدر شخير عبيس والاستاذ الدكتور رائد فنوخ ابو خضر والاستاذ المساعد الدكتور احمد محمد عباس والاستاذ الدكتور محمد عبد كاظم السعدي عضوا ومشرفا والاستاذ الدكتور هادي فاضل عبد المحسن عضوا ومشرفا.
بينت الباحثة خلال الدفاع عن اطروحتها ان السل الرئوي هو مرض معدي تسببه بكتريا العصوية المتفطرة السلية، وعادة ما يصيب الرئة، ولكن يمكن أن يؤثر أيضًا على مواقع أخرى (السل خارج الرئة)، وينتشر المرض عندما يطرد المرضى البكتيريا في الهواء.
الهدف الرئيسي من هذه الدراسة هو تقييم علاقة الخمول المناعي المرتبطة بقابلية الاصابة بعصيات التدرن وذلك عن طريق قياس مستويات المصل من IL-10 و IFN-? و Anti-Ascrais lumbricoides IgG ، كمؤشرات للخمول المناعي، تم قياسها باستخدام الامتزاز المناعي المرتبط بالإنزيم. تم أيضًا تقدير مستوى الزنك والنحاس باستخدام تقنية مقياس الطيف الضوئي ، ثم تم تضخيم الدراسة الجينية للجين CD152 (CTLA-4) G> A و CD28 G> T المقابل للجين (rs11571316) و (rs45620941) على التوالي باستخدام مجموعات محددة من البادئات. تم تحقيق التنميط الجيني بواسطة Allele specific –PCR.
كانت هذه الدراسة عبارة عن دراسة حالة-ضابطة أجريت على مرضى تمت إحالتهم إلى العيادة الاستشارية لأمراض الجهاز التنفسي في الحلة - محافظة بابل تتراوح أعمارهم بين (11- أكثر من 70سنة) خلال الفترة من كانون الثاني إلى تشرين الأول 2021 بعد الاشتباه في إصابتهم بمرض السل حسب مظاهرها السريرية. اشتملت الدراسة على 190 مشاركًا ، وتم جمع عينات من الدم الوريدي والبلغم من 110 مشتبهًا بمرض السل الرئوي، وبعد التشخيص كان هناك 50 حالة إصابة مؤكدة بالسل الرئوي، كما تم جمع الدم الوريدي من 40 مريضًا بالسل خارج الرئة على أساس النتائج السريرية و 40 عينة من السيطرة . كانت المجموعة الضابطة تنقسم إلى 20 شخصًا السيطرة الاصحاء و 20 شخصًا ملامسين الاصحاء من ذوي الفئة العمرية المتطابقة تقريبًا مع تلك الخاصة بالمرضى.
اشتملت الدراسة الحالية على ثلاثة أجزاء: الجزء الأول هو تشخيص المتفطرة السلية التي أجريت بالاعتماد على Acid Fast Stain ، وزرع على وسط Lowenstein-Jensen والتشخيص الجزيئي على أساس تقنية GeneXpert في عينة البلغم.
أظهرت نتائج الفحوصات التشخيصية من أصل 110 حالة سل رئوي مشتبه بها 26 (23.6?) عينة موجبة لفحص المسحة المباشر و 84 (76.3?)عينة سلبيةللمسحة المباشر ، كانت نتيجة الزرع على الوسط المائل كانت ايجابية في 10 (9?) عينات والباقي 100 (90.9) ?) كانت سلبية. كان GeneXpert موجبًا في 50 (45.45?) وكانت النسبة المتبقية 60 (54.5?) سلبية ، وكانت الحساسية ، والنوعية ، والقيمة التنبؤية الإيجابية ، والقيمة التنبؤية السلبية ، والدقة (60.4? ، 27? ، 98?) ، (95) ? ، 100? ، 98.3?) ، (89.6? ، 100? ، 98?) ، (77.9? ، 68.9? ، 98.3?) و (81? ، 72? ، 98.2?) لطريقة المسحة المباشرة ، الزراع و GeneXpert على التوالي. تم اعتبار GeneXpert الاختبار المعياري الذهبي نظرًا لدقته العالية مقارنة بالاختبارات الأخرى. و أيضا تم تشخيص (40) مريضا يعانون من حالات السل خارج الرئة على أساس النتائج السريرية في الدراسة الحالية التي وجدت أن نوع العينات كان: 18 (45?) غدد ليمفاوية ، 7 (17.5?) الانصباب الجنبي ، 6 (15) ?) العظام والمفاصل و 9 (22.5?) أخرى.
الجزء الثاني شمل الجزء المناعي ، تم الكشف عن مستوى المصل من انترلوكين 10 لـ 90 مريضاً بالسل ، وكان المتوسط و الانحراف المعياري (37.01 ± 37.93) ، (51.21 ± 41.40) ، (14.47 ± 13.74) ، و (15.10 ±). 8.18) لـ 50 حالة من حالات السل الرئوي و 40 حالة من حالات السل خارج الرئة و 20 حالة السيطرة الاصحاء و 20 حالة ملامسين اصحاء على التوالي. تم الكشف عن مستوى مصل الإنترفيرون كاما لـ 90 مريضاً بالسل ، وكان المتوسط و الانحراف المعياري (29.49 ± 8.68) ، (45.24 ± 21.44) ، (36.17 ± 6.43) ، (42.72 ± 7.42) لـ 50 حالة من حالات السل الرئوي ، 40 حالة من حالات السل خارج الرئة و 20 حالة السيطرة الاصحاء و 20 حالة ملامسين اصحاء على التوالي. وقد عبر المرضى زيادة معنوية عن مستوى عالٍ من السيتوكينات لـ TH2 (IL-10) من TH1 (IFN-?).
تم الكشف عن مستوى المصل لمضاد Ascrais lumbricoides-IgG كسبب للخمول المناعي لـ 90 مريضاً بالسل. كان المتوسط و الانحراف المعياري (0.43 ± 0.17) و (0.23 ± 0.02) و (0.20 ± 0.19) 50 حالة من حالات السل الرئوي و 40 حالة من حالات السل خارج الرئة و 20 حالة السيطرة الاصحاء و 20 حالة ملامسين اصحاء على التوالي. اظهرت النتائج ان مرضى السل كانوا اعلى من الاصحاء.
كان متوسط مستوى الزنك في الدم 28.3 ميكروغرام / ديسيلتر لمرضى السل الرئوي ، و 27.2 ميكروغرام / ديسيلتر لمرضى السل خارج الرئة و 89.16 ميكروغرام / ديسيلتر للأشخاص الضابطة. كان متوسط مستوى النحاس في الدم 203.6 ميكروغرام / ديسيلتر لمرضى السل الرئوي ، و 182.7 ميكروغرام / ديسيلتر لمرضى السل خارج الرئة و 128.9 ميكروغرام / ديسيلتر للأشخاص الضابطة. وأظهرت أن مستوى الزنك كان أقل في مرضى السل منه في المجموعة الضابطة ، في حين أن مستوى النحاس أعلى في مرضى السل منه في المجموعة الضابطة.
تضمن الجزء الثالث من الدراسة الحالية الدراسة الجينية لجينات CD152 rs11571316 G> A و CD28 rs45620941 G> T. تم اختيار المتغيرات الجينية التي سيتم دراستها في هذا المشروع بعناية وفقًا للنتائج الحديثة في هذا المجال ، وباستخدام العديد من قواعد البيانات المتخصصة. تم تصميم وتحسين التنميط الجيني للجين CD152 و CD28 بواسطة طريقة Allele specific -PCR.
فيما يتعلق بنتائج الجزء الجيني أظهرت عدم وجود ارتباط أليلي أو وراثي معنوي مسجل بين مجموعة المرضى ومجموعة الاصحاء للجين CD152 المدروس. كما أظهرت بيانات التسلسل للجين CD152 (rs11571316) حوالي 99? من التشابه في التسلسل بين العينات المتسلسلة والتسلسلات المستهدفة CD152 المرجعية المقصودة. بينما أظهر النمط الوراثي CD28 rs45620941 أن النمط الجيني GG وتردد أليل G كان بشكل ملحوظ في مرضى السل مقارنةً بالملامسين والسيطرة الاصحاء الذي يشير إلى أن النمط الجيني يعتبر ميزة وقائية من مرض السل ، بينما يشير النمط الجيني TT إلى تأثير تعدد الأشكال في حدوث السل.
بقلم: عباس مجيد